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Instrumentation, Mesure, Métrologie

1631-4670
Revue des Systèmes
 

 ARTICLE VOL 8/1-4 - 2008  - pp.157-179  - doi:10.3166/i2m.8.157-179
TITRE
Microscopie de fluorescence quantitative 3D et microscopie tomographique optique diffractive 3D

RÉSUMÉ

La microscopie optique est une technique de référence en biologie. Les images 3D obtenues par cette technique souffrent cependant de certaines imperfections. En microscopie de fluorescence, les images doivent être débruitées et déconvoluées avant toute mesure quantitative. Il convient aussi de corriger certains artefacts dus au phénomène de photoblanchement par exemple. La quantification en intensité de fluorescence demeure encore un problème. De même, il reste difficile d'imager des spécimens non marqués. La microscopie tomographique optique diffractive est une méthode permettant d'imager de tels spécimens, mais aussi de mesurer la distribution des indices optiques dans le spécimen. Ce point a son importance aussi en microscopie de fluorescence ; en effet, l'image de fluorescence est déformée par la non-homogénéité optique du spécimen observé.

ABSTRACT

Optical microscopy is a reference technique in biology. The 3-D images obtained via this technique however do suffer from some imperfections. In fluorescence microscopy, the images must be first denoised and deconvolved before quantitative measurements can be done. Preprocessing in order to correct for some artefacts like photobleaching must also be performed. Intensity calibration is still difficult. Similarly, it is not easy to image nonlabelled specimens. Optical diffractive tomographic microscopy permits to image such specimens, but also to measure the index of refraction distribution within the specimen. This point is also of importance for fluorescence microscopy, as indeed the measured fluorescence distribution is deformed by the optical non-homogeneity of the observed specimen.

AUTEUR(S)
Arnaud DE MEYER, Bertrand SIMON, c. CUDEL, b. COLICCHIO, Vincent GEORGES, m. DEBAILLEUL, a. DIETERLEN, o. HAEBERLÉ

MOTS-CLÉS
microscopie de fluorescence 3D, quantification, métrologie, microscopie holographique, microscopie tomographique optique diffractive 3D.

KEYWORDS
3-D fluorescence microscopy, calibration, metrology, holographic microscopy, 3-D optical diffractive tomographic microscopy.

LANGUE DE L'ARTICLE
Français

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